Diagnosis molekuler berhubungan dengan satu set teknik molekuler yang bertujuan untuk mengidentifikasi perubahan dalam DNA yang mungkin menunjukkan penyakit genetik atau kanker, misalnya. Selain itu, teknik molekuler sedang banyak digunakan untuk identifikasi dan konfirmasi penyakit menular, karena mereka merupakan metode diagnostik yang lebih cepat dan lebih akurat.
Diagnosis molekuler mahal dan oleh karena itu tidak terlalu sering diminta oleh dokter, namun, memberikan hasil yang tepat mengenai adanya perubahan, cara itu dapat mengganggu fungsi organisme dan respon pasien terhadap penyakit. pengobatan.
Untuk apa itu
Diagnosis molekuler dapat dilakukan dengan beberapa tujuan, yang utama adalah:
- Identifikasi mutasi yang berkaitan dengan leukemia, seperti identifikasi translokasi BCR-ABL, yang merupakan karakteristik Leukemia Myeloid Kronis (CML);
- Mutasi karakteristik penyakit hematologi, seperti hemochromatosis keturunan, polycythemia vera, trombositemia esensial dan trombofilia, misalnya - memahami apa itu trombofilia dan bagaimana pengobatan dilakukan;
- Perubahan molekuler yang menunjukkan terjadinya kanker, seperti kanker kolorektal, paru-paru, payudara dan otak, misalnya;
- Diagnosis penyakit infeksi seperti hepatitis, uretritis, toksoplasmosis, leishmaniasis, dll., Selain mengidentifikasi virus HPV .
Diagnosis molekuler, meskipun dianggap mahal jika dibandingkan dengan teknik diagnostik lainnya, lebih akurat, karena mampu menginformasikan perubahan yang terkait dengan penyakit tertentu dan tingkat pengaruh perubahan ini pada organisme, sehingga membantu perawatan orang tersebut.
Selain digunakan untuk diagnosis berbagai penyakit, teknik molekuler juga digunakan untuk mengevaluasi respon terhadap pengobatan, terutama pada orang dengan kanker, menjadi salah satu metode yang paling efektif untuk menunjukkan evolusi penyakit dan kambuh.
Bagaimana itu dilakukan
Diagnosis molekuler dapat dilakukan dengan sampel apa saja, dan dokter diminta untuk memberikan informasi tentang kondisi pasien, yang mungkin urin, air liur atau, sebagian besar waktu, darah. Tidak perlu berpuasa atau persiapan lain untuk pemeriksaan.
Sampel dikumpulkan dan dikirim ke laboratorium bersama dengan saran dokter yang menginformasikan ujian atau jenis penelitian yang harus dilakukan. Teknik molekuler yang dilakukan tergantung pada pemeriksaan yang diminta dan melibatkan serangkaian prosedur yang tepat yang tujuan utamanya adalah untuk mengidentifikasi ada tidaknya perubahan yang diminta oleh dokter.
Biasanya hanya sejumlah kecil sampel yang digunakan, sisanya disimpan sehingga, jika perlu, tes diulang.
Lihat apa teknik molekuler utama
PCR
PCR, kependekan dari Polymerase Chain Reaction, adalah teknik molekuler yang terdiri dari memperkuat fragmen materi genetik, baik itu DNA atau RNA, dengan tujuan mengidentifikasi mutasi dan, dengan demikian, membantu diagnosis penyakit.
Teknik ini dibuat dari ekstraksi dan pemurnian materi genetik, yang kemudian ditempatkan dalam campuran di mana salah satu komponen adalah enzim restriksi yang bervariasi sesuai dengan pemeriksaan yang diminta dan yang fungsinya adalah memotong material menjadi fragmen. untuk mengidentifikasi kemungkinan perubahan genetik. Campuran ditempatkan dalam termokopler, yang merupakan alat yang bertindak melalui variasi temperatur yang ditunjukkan oleh profesional menurut pemeriksaan dan, dengan cara ini, memungkinkan amplifikasi fragmen genetik. Dalam kasus PCR konvensional, setelah amplifikasi, produk PCR dikenakan elektroforesis, yang merupakan teknik molekuler berdasarkan berat dan ukuran fragmen, yaitu sesuai dengan karakteristik ini pola pita yang dihasilkan, analisis yang dilakukan berdasarkan band kontrol positif, yaitu, dalam band yang dikenal sesuai dengan perubahan genetik.
PCR real-time, juga disebut qPCR, adalah jenis PCR kuantitatif, yaitu, selain mengidentifikasi perubahan genetika, ia mampu memberikan informasi tentang ekspresi gen, yaitu, seberapa banyak gen yang diubah diekspresikan dalam organisme., dan dengan demikian dapat digunakan untuk membantu diagnosis dan memantau pengobatan. PCR real-time tidak memerlukan elektroforesis, seluruh proses amplifikasi dan analisis materi genetik dilakukan oleh aparat dan hasilnya ditafsirkan oleh profesional kesehatan yang terlatih.
Sequencing
Sequencing adalah teknik molekuler yang terdiri dari penentuan urutan nukleotida DNA. Sekuensing terjadi dari reaksi mirip PCR, namun, dalam campuran amplifikasi, nukleotida dimodifikasi oleh penambahan fluorochrom ditambahkan, bahwa sebagai bahan diperkuat, nukleotida yang dimodifikasi dimasukkan ke dalam DNA dan menghasilkan beberapa fragmen, yang sesuai dengan produk sekuensing.
Produk reaksi ditempatkan dalam suatu peralatan yang disebut sekuens DNA, dimana serpihan-serpihan dipukul oleh laser peralatan, fluorochromes tereksitasi, memancarkan fluoresensi, yang ditunjukkan oleh peralatan melalui puncak, masing-masing puncak yang sesuai. ke nukleotida. Pada akhir reaksi peralatan akan menginformasikan urutan DNA, sehingga membantu dokter dalam diagnosis penyakit genetik.
